【摘要】 目的探讨灵芝孢子油对化学性肝损伤的保护作用。方法对昆明种小鼠每日经口分别灌胃给予0.33g/kg、0.67g/kg和2.00g/kg的灵芝孢子油。30天后，以0.1ml/10g BW的剂量一次性经腹腔注射给予0.125%CCl4（四氯化碳）。结果0.67g/kg和2.00g/kg剂量组的血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平降低，与CCl4对照组比较(P＜0.05)；2.00g/kg剂量组发生肝细胞坏死的动物例数明显减少，病变程度减轻，坏死评分低于CCl4对照组(P＜0.01)。结论灵芝孢子油对CCl4化学性肝损伤具有保护作用。
【关键词】灵芝孢子油 四氯化碳 肝损伤
【Abstract】 ObjectiveTo explore the protective effects of ganderoma lucium oil on chemical liver injury.MethodsKM mice were given ganderoma lucium oil orally at the dose of 0.33g/kg，0.67g/kg and 2.00g/kg daily.30 days later，0.10ml/kg (0.125%)CCl4 were intraperitoneally injected.Results(1) The serum ALT and AST levels of 0.67g/kg and 2.00g/kg group were significantly decreased compared with the CCl4 control group.(2)The animal amount of happening hepatic cell necrosis changes in 2.00g/kg group was lowered，the degree of pathobiological changes was lightened，and the cell necrosis- changed evaluation had dramatical differences compared with the CCl4 control group.ConclusionGanderoma lucium oil had protective effects on chemical liver injury.
【Key words】ganderoma lucium oil CCl4 liver injury
生产和生活中接触化学性毒物(如CCl4)、酗酒和医源性药物损害是导致化学性肝损伤发生的主要途径。为了减少化学性肝损伤的发生率，有必要 研究 开发具有护肝作用的生物源性物质。灵芝孢子是灵芝的遗传“种子”，内藏灵芝生命遗传基因，富含萌发新生命所需的一切物质［1］。 中国 科学 院的科学家们经多次研究实验，发现了蕴藏在灵芝孢子内的灵芝孢子油，是灵芝发挥抑制肿瘤、保健、 治疗 作用的“主力”［2］。本文以昆明种小鼠为研究对象，以CCl4为染毒物，探讨了灵芝孢子油对化学性肝损伤的保护作用。
1 材料与方法
1.1材料 样品灵芝孢子油为浅棕黄色油状物，软胶囊包装，品种为赤芝ganderoma lucium (Leyss，exFr.)Karst.由广州某生物工程公司采用科学萃取技术提取。各实验剂量组所需浓度均用玉米油稀释样品配成。清洁级昆明种雌性小白鼠，6～8周龄(体重：18～22g)，由广东省医学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号：SCXK(粤)2003-0002。颗粒饲料由广东省医学实验动物中心提供。SPF级实验动物使用许可证号：SYXK(粤) 2003-011。室温(22±2)℃，湿度60%～80％。
1.2检测项目 血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）及肝脏病 理学 检验。
1.3仪器及试剂 用日立7060全自动生化仪进行检测，试剂生产商为日本和光纯药 工业 株式会社。CCl4为 分析 纯、AR级，广州生化试剂厂生产。
1.4实验方法 实验动物在实验室条件下检疫1周后，随机分成空白对照组、CCl4对照组及低、中、高3个剂量组，分别为0.33、0.67、2.00g/kg，每组11～13只小鼠。3个剂量组每天分别按不同剂量灌胃给予样品，空白对照组和CCl4对照组灌予玉米油(0.1ml/10g)，共30天。于实验结束前1天将各组动物隔夜禁食16h，各剂量组和CCl4对照组经腹腔注射(0.1ml/10g)一次性给予0.125% CCl4，空白对照组给予玉米油，各受试物剂量组继续给予受试样品至实验结束（与CCl4腹腔注射间隔4h以上）。24h后摘眼球取血，分离血清做生化测定。取肝脏用10%的中性福尔马林固定，常规制作病理切片，HE染色，光镜下观察病理变化。
1.5统计学方法 统计资料采用SPSS 10.0统计软件包进行统计分析，统计方法采用方差分析和秩和检验。
2 结果
2.1灵芝孢子油对受试动物ALT及AST水平的 影响 CCl4对照组ALT和AST水平与空白对照组比较升高，差异有非常显著性（P＜0.01），表明CCl4肝损伤模型成立。灵芝孢子油各剂量组ALT和AST水平与CCl4对照组比较，血清ALT和AST水平下降，其中中、高剂量组血清ALT的差异均有非常显著性(P＜0.01)；AST的差异均有显著性(P＜0.05)，见表1。结果表明，ALT和AST结果阳性。
表1 灵芝孢子油对ALT、AST水平的影响 (x±s)
注：空白对照组和CCl4对照组比较采用t检验，△△P＜0.01；各剂量组与CCl4对照组比较采用方差分析；比较**P＜0.01，*表示P＜0.05
2.2灵芝孢子油对受试动物肝脏病理变化的影响 CCl4对照组和灵芝孢子油各剂量组动物的肝脏病理改变以肝细胞坏死和气球样变为主，病变部位主要在肝小叶中央静脉周围。CCl4对照组与空白对照组比较，有明显的肝脏损伤，经统计学检验，差异有非常显著性(P＜0.01)，表明CCl4肝损伤模型成立，见表2。灵芝孢子油各剂量组肝细胞坏死评分与CCl4对照组比较，差异有非常显著性(P＜0.01)；其它病变类型各剂量组与CCl4对照组比较，差异无显著性(P＞0.05)。结果表明：实验动物肝脏病理结果阳性，见表3。
【关键词】灵芝孢子油 四氯化碳 肝损伤
【Abstract】 ObjectiveTo explore the protective effects of ganderoma lucium oil on chemical liver injury.MethodsKM mice were given ganderoma lucium oil orally at the dose of 0.33g/kg，0.67g/kg and 2.00g/kg daily.30 days later，0.10ml/kg (0.125%)CCl4 were intraperitoneally injected.Results(1) The serum ALT and AST levels of 0.67g/kg and 2.00g/kg group were significantly decreased compared with the CCl4 control group.(2)The animal amount of happening hepatic cell necrosis changes in 2.00g/kg group was lowered，the degree of pathobiological changes was lightened，and the cell necrosis- changed evaluation had dramatical differences compared with the CCl4 control group.ConclusionGanderoma lucium oil had protective effects on chemical liver injury.
【Key words】ganderoma lucium oil CCl4 liver injury
生产和生活中接触化学性毒物(如CCl4)、酗酒和医源性药物损害是导致化学性肝损伤发生的主要途径。为了减少化学性肝损伤的发生率，有必要 研究 开发具有护肝作用的生物源性物质。灵芝孢子是灵芝的遗传“种子”，内藏灵芝生命遗传基因，富含萌发新生命所需的一切物质［1］。 中国 科学 院的科学家们经多次研究实验，发现了蕴藏在灵芝孢子内的灵芝孢子油，是灵芝发挥抑制肿瘤、保健、 治疗 作用的“主力”［2］。本文以昆明种小鼠为研究对象，以CCl4为染毒物，探讨了灵芝孢子油对化学性肝损伤的保护作用。
1 材料与方法
1.1材料 样品灵芝孢子油为浅棕黄色油状物，软胶囊包装，品种为赤芝ganderoma lucium (Leyss，exFr.)Karst.由广州某生物工程公司采用科学萃取技术提取。各实验剂量组所需浓度均用玉米油稀释样品配成。清洁级昆明种雌性小白鼠，6～8周龄(体重：18～22g)，由广东省医学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号：SCXK(粤)2003-0002。颗粒饲料由广东省医学实验动物中心提供。SPF级实验动物使用许可证号：SYXK(粤) 2003-011。室温(22±2)℃，湿度60%～80％。
1.2检测项目 血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）及肝脏病 理学 检验。
1.3仪器及试剂 用日立7060全自动生化仪进行检测，试剂生产商为日本和光纯药 工业 株式会社。CCl4为 分析 纯、AR级，广州生化试剂厂生产。
1.4实验方法 实验动物在实验室条件下检疫1周后，随机分成空白对照组、CCl4对照组及低、中、高3个剂量组，分别为0.33、0.67、2.00g/kg，每组11～13只小鼠。3个剂量组每天分别按不同剂量灌胃给予样品，空白对照组和CCl4对照组灌予玉米油(0.1ml/10g)，共30天。于实验结束前1天将各组动物隔夜禁食16h，各剂量组和CCl4对照组经腹腔注射(0.1ml/10g)一次性给予0.125% CCl4，空白对照组给予玉米油，各受试物剂量组继续给予受试样品至实验结束（与CCl4腹腔注射间隔4h以上）。24h后摘眼球取血，分离血清做生化测定。取肝脏用10%的中性福尔马林固定，常规制作病理切片，HE染色，光镜下观察病理变化。
1.5统计学方法 统计资料采用SPSS 10.0统计软件包进行统计分析，统计方法采用方差分析和秩和检验。
2 结果
2.1灵芝孢子油对受试动物ALT及AST水平的 影响 CCl4对照组ALT和AST水平与空白对照组比较升高，差异有非常显著性（P＜0.01），表明CCl4肝损伤模型成立。灵芝孢子油各剂量组ALT和AST水平与CCl4对照组比较，血清ALT和AST水平下降，其中中、高剂量组血清ALT的差异均有非常显著性(P＜0.01)；AST的差异均有显著性(P＜0.05)，见表1。结果表明，ALT和AST结果阳性。
表1 灵芝孢子油对ALT、AST水平的影响 (x±s)
注：空白对照组和CCl4对照组比较采用t检验，△△P＜0.01；各剂量组与CCl4对照组比较采用方差分析；比较**P＜0.01，*表示P＜0.05
2.2灵芝孢子油对受试动物肝脏病理变化的影响 CCl4对照组和灵芝孢子油各剂量组动物的肝脏病理改变以肝细胞坏死和气球样变为主，病变部位主要在肝小叶中央静脉周围。CCl4对照组与空白对照组比较，有明显的肝脏损伤，经统计学检验，差异有非常显著性(P＜0.01)，表明CCl4肝损伤模型成立，见表2。灵芝孢子油各剂量组肝细胞坏死评分与CCl4对照组比较，差异有非常显著性(P＜0.01)；其它病变类型各剂量组与CCl4对照组比较，差异无显著性(P＞0.05)。结果表明：实验动物肝脏病理结果阳性，见表3。
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