作者：张静霜，朱西杰，朱微微，陈健茂，吴璟，李卫强
【摘要】
目的观察复方蜥蜴散对慢性萎缩性胃炎（Chronic Atrophic Gastritis，CAG）模型大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF－α）及胃黏膜病理形态学的影响,探讨其 治疗 CAG的作用机制。方法将90只SD雄性大鼠随机分为正常组，模型组，复方蜥蜴散大、中、小剂量组及维酶素组,除正常组以外，均采取55℃热盐水、2%水杨酸、20 mmol/L脱氧胆酸钠3个致萎缩因素配合饥饱失常造成CAG模型大鼠,分别运用复方蜥蜴散大、中、小剂量及维酶素治疗,观察各组大鼠血清TNF－α的含量及胃黏膜的病 理学 形态。结果蜥蜴散大、中、小剂量组血清中TNF-α含量显著低于模型组（P<0.01），蜥蜴散大、中剂量组血清中TNF-α含量显著低于维酶素组（P<0.05）。各组胃黏膜组织形态学观察，复方蜥蜴散组较模型组及维酶素组有明显改善。结论复方蜥蜴散可以使CAG模型大鼠血清中TNF－α含量降低，能够明显改善CAG模型大鼠胃黏膜的炎症、萎缩性病变,对CAG模型大鼠有明显的治疗作用。
【关键词】 慢性萎缩性胃炎 复方蜥蜴散 肿瘤坏死因子-α 病理组织学
Abstract：ObjectiveTo investigate the effect of compound lizards powder(TCLP) ,a compound Chinese medicine ,on the tumor necrosis factor－α(TNF－α), and gastric mucosa pathological change in rat model of Chronic Atrophic Gastritis（CAG）. and the mechanisms.MethodsNinety male SD rats were randomly divided into six groups:the normal control group,the model group，the Vitacoenzyme control group，the low-dose,middle-dose and high-dose TCLP groups. Except normal control group, other groups took 55℃ hot water which contained 150g/L NaCl,2% Salieylas and 20mmol/L sodium deoxyeholate,combined with overeating and hungering.All rats were treated with different medicines，after a month the rats were sacrificed，and thEir gastric mucosa and serum were collected to detect the serum level of TNF－α and observe the histology mucosa changes by microscope.ResultsCompared with model group，the serum level of TNF－α in the rats of all TCLP groups was significantly lowered(P<0.01). Compared with Vitacoenzyme control group the serum level of TNF－α in the rats of middle-dose and high-dose TCLP groups was significantly lowered(P<0.05), and the pathological changes were significant. ConclusionTCLP can significantly adjust level of TNF－α,and has protective function against the gastric mucosal injury.
Key words： Chronic Atrophic Gastritis (CAG); The compound lizards powder; Tumor Putrescence Factor (TNF); Pathological histology
慢性萎缩性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis，CAG)是消化系统的常见病，其以胃黏膜变薄、固有腺体萎缩或伴有肠化、异型增生为主要病理改变。CAG与胃息肉同时存在或肠化生合并中度或高度不典型增生时可发生癌变，张玲霞等［1］对CAG患者10～20年的随访发现,有5%～10%的患者发生了胃癌,WHO将其列为胃癌前期状态。本课题以朱西杰教授治疗CAG疗效确切的临床验方复方蜥蜴散(the compound Lizards Powder，TCLP；以下简称蜥蜴散),来观察其对CAG模型大鼠肿瘤坏死因子－α（Tumor Necrosis Factor－α，TNF－α）及胃黏膜病理组织学的影响，探讨其对CAG的治疗机理，为临床治疗提供依据。
1 材料与仪器
1.1 动物清洁级SD雄性大鼠90只，鼠龄8周，体质量（180±20）g；标准颗粒饲料，均由宁夏医科大学实验动物中心提供，合格证号sc-xk(宁)2005-001。
1.2 药物及试剂蜥蜴散：由蜥蜴粉、鹿角霜粉、海螵蛸粉、炒白术粉、半枝莲粉等组成，由宁夏医科大学中医消化病研究所提供。维酶素：0.2 g/片,新乡恒久远药业有限公司生产，批号20080311；脱氧胆酸钠：北京市海淀区微生物培养基制品厂生产(含量>95%)，批号: 080716；氯化钠：天津市福晨化学试剂厂生产(含量≥99.5%)，批号:20080624；水杨酸：天津市福晨化学试剂厂生产(含量≥99.5%)，批号：20080427；肿瘤坏死因子放射免疫分析药盒:北京科美东雅生物技术有限公司出品，批号：S20063093。
1.3 仪器与设备数显恒温水浴箱：北京长源实验设备厂生产。 电子 天平AL104:梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司生产；TD5A-WS台式离心机：长沙湘仪离心仪器有限公司出品。
2 方法
2.1 药物配制①脱氧胆酸钠溶液:用生理盐水配成20 mmol/L的脱氧胆酸钠溶液(pH值7～7.8)。②氯化钠溶液:用双蒸水配成150 g/L的氯化钠溶液，临用时加热至55℃；用双蒸水配成0.9%的氯化钠溶液。③水杨酸溶液:用生理盐水配成浓度为2%的水杨酸溶液。④维酶素混悬液: 维酶素片研末，用生理盐水配成0.1/m1的混悬液。⑤蜥蜴散糊剂：蜥蜴散经过粉碎、高温灭菌、蒸2h，晾干后，用双蒸水分别配成0.28，0.14，0.07 g/ml糊剂混悬液装瓶，4℃冰箱保存备用。
2.2 动物分组将90只SD雄性大鼠随机分为正常组（A组）、模型组（B组）、维酶素组（C组）、蜥蜴散大剂量组（D组）、蜥蜴散中剂量组（E组）、蜥蜴散小剂量组（F组）6组，每组15只，除A组外，其余大鼠均给予造模处理。
2.3 动物模型的建立及处理措施
2.3.1 CAG模型的建立参阅大量的 文献 资料［2～6］，结合中西医理论，具体的造模方法为∶配制浓度为150 g/L盐水，加热到55℃，10 ml/kg·d，灌胃，1次/d；2%水杨酸溶液10 ml/kg·d，灌胃，1次/d；20 mmol/L脱氧胆酸钠溶液，自由饮用;同时配以饥饱失常处理，即2 d饱食，ld禁食。B～F组按上述造模方法造模90 d，A组大鼠充足供应标准颗粒饲料及清洁自来水。
2.3.2 处理措施分别在造模第30天、60天、90天各组处死1只大鼠，取胃黏膜做病检以证实造模成功后， A组大鼠仍然充足供食及饮清洁自来水，B～F组大鼠则停止造模，A组与 B组大鼠开始给予生理盐水10 ml/(kg·d)灌胃，1次/d；C组大鼠给予0.1/ml维酶素混悬液10 ml/(kg·d)灌胃，1次/ d；D组、E组、F组大鼠分别给予蜥蜴散大剂量（20 g/kg·d）、中剂量（10 g/kg·d）、小剂量（5 g/kg·d）灌胃，1次/d；连续用药1个月(蜥蜴散中剂量按照正常人剂量换算而来，大剂量加倍，小剂量减半)。
2.4 标本采集和处理至预定阶段，大鼠禁食24 h后，全部用l0%水合氯醛溶液腹腔内注射麻醉大鼠，心脏取血5 ml置于无菌试管，待测。剖腹，距贲门和幽门1.5 cm离断取出全胃并处死。沿胃大弯侧剖开，冰生理盐水冲洗后，滤纸吸干铺开。胃黏膜标本固定于10%的中性福尔马林溶液中，固定48 h后剪成约2 mm的条状物，石蜡包埋，常规切片，HE染色，观察病理组织学改变。
2.5 用放射免疫法测定血清TNF－α取血2 ml，在4℃，4 000 r/min条件下离心10 min，取上清液，零下 20℃冻存。测定方法采用固相放射免疫检测严格按说明书操作，在曲线上查得的待测样品的含量，以ng/ml表示。
2.6 统计学处理TNF－α数据采用±s表示，数据采用SPSS 11.5统计软件处理。
3 结果
3.1 CAG大鼠血清TNF－α检测结果各治疗组与模型组比较（P<0.01）说明各治疗组对CAG均有显著疗效，蜥蜴散大、中剂量组与维酶素组比较P<0.05，说明蜥蜴散大、中剂量组治疗效果显著优于维酶素组；蜥蜴散小剂量组与维酶素组比较P>0.05说明治疗效果无明显差别，考虑为剂量过小引起。蜥蜴散大、小剂量组之间比较（P<0 .05)，蜥蜴散中、小剂量组之间比较（P<0.05），说明蜥蜴散大、中剂量组疗效优于小剂量组。结果见表1。表1 不同治疗组血清TNFα的含量（略）
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【摘要】
目的观察复方蜥蜴散对慢性萎缩性胃炎（Chronic Atrophic Gastritis，CAG）模型大鼠肿瘤坏死因子-α（TNF－α）及胃黏膜病理形态学的影响,探讨其 治疗 CAG的作用机制。方法将90只SD雄性大鼠随机分为正常组，模型组，复方蜥蜴散大、中、小剂量组及维酶素组,除正常组以外，均采取55℃热盐水、2%水杨酸、20 mmol/L脱氧胆酸钠3个致萎缩因素配合饥饱失常造成CAG模型大鼠,分别运用复方蜥蜴散大、中、小剂量及维酶素治疗,观察各组大鼠血清TNF－α的含量及胃黏膜的病 理学 形态。结果蜥蜴散大、中、小剂量组血清中TNF-α含量显著低于模型组（P<0.01），蜥蜴散大、中剂量组血清中TNF-α含量显著低于维酶素组（P<0.05）。各组胃黏膜组织形态学观察，复方蜥蜴散组较模型组及维酶素组有明显改善。结论复方蜥蜴散可以使CAG模型大鼠血清中TNF－α含量降低，能够明显改善CAG模型大鼠胃黏膜的炎症、萎缩性病变,对CAG模型大鼠有明显的治疗作用。
【关键词】 慢性萎缩性胃炎 复方蜥蜴散 肿瘤坏死因子-α 病理组织学
Abstract：ObjectiveTo investigate the effect of compound lizards powder(TCLP) ,a compound Chinese medicine ,on the tumor necrosis factor－α(TNF－α), and gastric mucosa pathological change in rat model of Chronic Atrophic Gastritis（CAG）. and the mechanisms.MethodsNinety male SD rats were randomly divided into six groups:the normal control group,the model group，the Vitacoenzyme control group，the low-dose,middle-dose and high-dose TCLP groups. Except normal control group, other groups took 55℃ hot water which contained 150g/L NaCl,2% Salieylas and 20mmol/L sodium deoxyeholate,combined with overeating and hungering.All rats were treated with different medicines，after a month the rats were sacrificed，and thEir gastric mucosa and serum were collected to detect the serum level of TNF－α and observe the histology mucosa changes by microscope.ResultsCompared with model group，the serum level of TNF－α in the rats of all TCLP groups was significantly lowered(P<0.01). Compared with Vitacoenzyme control group the serum level of TNF－α in the rats of middle-dose and high-dose TCLP groups was significantly lowered(P<0.05), and the pathological changes were significant. ConclusionTCLP can significantly adjust level of TNF－α,and has protective function against the gastric mucosal injury.
Key words： Chronic Atrophic Gastritis (CAG); The compound lizards powder; Tumor Putrescence Factor (TNF); Pathological histology
慢性萎缩性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis，CAG)是消化系统的常见病，其以胃黏膜变薄、固有腺体萎缩或伴有肠化、异型增生为主要病理改变。CAG与胃息肉同时存在或肠化生合并中度或高度不典型增生时可发生癌变，张玲霞等［1］对CAG患者10～20年的随访发现,有5%～10%的患者发生了胃癌,WHO将其列为胃癌前期状态。本课题以朱西杰教授治疗CAG疗效确切的临床验方复方蜥蜴散(the compound Lizards Powder，TCLP；以下简称蜥蜴散),来观察其对CAG模型大鼠肿瘤坏死因子－α（Tumor Necrosis Factor－α，TNF－α）及胃黏膜病理组织学的影响，探讨其对CAG的治疗机理，为临床治疗提供依据。
1 材料与仪器
1.1 动物清洁级SD雄性大鼠90只，鼠龄8周，体质量（180±20）g；标准颗粒饲料，均由宁夏医科大学实验动物中心提供，合格证号sc-xk(宁)2005-001。
1.2 药物及试剂蜥蜴散：由蜥蜴粉、鹿角霜粉、海螵蛸粉、炒白术粉、半枝莲粉等组成，由宁夏医科大学中医消化病研究所提供。维酶素：0.2 g/片,新乡恒久远药业有限公司生产，批号20080311；脱氧胆酸钠：北京市海淀区微生物培养基制品厂生产(含量>95%)，批号: 080716；氯化钠：天津市福晨化学试剂厂生产(含量≥99.5%)，批号:20080624；水杨酸：天津市福晨化学试剂厂生产(含量≥99.5%)，批号：20080427；肿瘤坏死因子放射免疫分析药盒:北京科美东雅生物技术有限公司出品，批号：S20063093。
1.3 仪器与设备数显恒温水浴箱：北京长源实验设备厂生产。 电子 天平AL104:梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司生产；TD5A-WS台式离心机：长沙湘仪离心仪器有限公司出品。
2 方法
2.1 药物配制①脱氧胆酸钠溶液:用生理盐水配成20 mmol/L的脱氧胆酸钠溶液(pH值7～7.8)。②氯化钠溶液:用双蒸水配成150 g/L的氯化钠溶液，临用时加热至55℃；用双蒸水配成0.9%的氯化钠溶液。③水杨酸溶液:用生理盐水配成浓度为2%的水杨酸溶液。④维酶素混悬液: 维酶素片研末，用生理盐水配成0.1/m1的混悬液。⑤蜥蜴散糊剂：蜥蜴散经过粉碎、高温灭菌、蒸2h，晾干后，用双蒸水分别配成0.28，0.14，0.07 g/ml糊剂混悬液装瓶，4℃冰箱保存备用。
2.2 动物分组将90只SD雄性大鼠随机分为正常组（A组）、模型组（B组）、维酶素组（C组）、蜥蜴散大剂量组（D组）、蜥蜴散中剂量组（E组）、蜥蜴散小剂量组（F组）6组，每组15只，除A组外，其余大鼠均给予造模处理。
2.3 动物模型的建立及处理措施
2.3.1 CAG模型的建立参阅大量的 文献 资料［2～6］，结合中西医理论，具体的造模方法为∶配制浓度为150 g/L盐水，加热到55℃，10 ml/kg·d，灌胃，1次/d；2%水杨酸溶液10 ml/kg·d，灌胃，1次/d；20 mmol/L脱氧胆酸钠溶液，自由饮用;同时配以饥饱失常处理，即2 d饱食，ld禁食。B～F组按上述造模方法造模90 d，A组大鼠充足供应标准颗粒饲料及清洁自来水。
2.3.2 处理措施分别在造模第30天、60天、90天各组处死1只大鼠，取胃黏膜做病检以证实造模成功后， A组大鼠仍然充足供食及饮清洁自来水，B～F组大鼠则停止造模，A组与 B组大鼠开始给予生理盐水10 ml/(kg·d)灌胃，1次/d；C组大鼠给予0.1/ml维酶素混悬液10 ml/(kg·d)灌胃，1次/ d；D组、E组、F组大鼠分别给予蜥蜴散大剂量（20 g/kg·d）、中剂量（10 g/kg·d）、小剂量（5 g/kg·d）灌胃，1次/d；连续用药1个月(蜥蜴散中剂量按照正常人剂量换算而来，大剂量加倍，小剂量减半)。
2.4 标本采集和处理至预定阶段，大鼠禁食24 h后，全部用l0%水合氯醛溶液腹腔内注射麻醉大鼠，心脏取血5 ml置于无菌试管，待测。剖腹，距贲门和幽门1.5 cm离断取出全胃并处死。沿胃大弯侧剖开，冰生理盐水冲洗后，滤纸吸干铺开。胃黏膜标本固定于10%的中性福尔马林溶液中，固定48 h后剪成约2 mm的条状物，石蜡包埋，常规切片，HE染色，观察病理组织学改变。
2.5 用放射免疫法测定血清TNF－α取血2 ml，在4℃，4 000 r/min条件下离心10 min，取上清液，零下 20℃冻存。测定方法采用固相放射免疫检测严格按说明书操作，在曲线上查得的待测样品的含量，以ng/ml表示。
2.6 统计学处理TNF－α数据采用±s表示，数据采用SPSS 11.5统计软件处理。
3 结果
3.1 CAG大鼠血清TNF－α检测结果各治疗组与模型组比较（P<0.01）说明各治疗组对CAG均有显著疗效，蜥蜴散大、中剂量组与维酶素组比较P<0.05，说明蜥蜴散大、中剂量组治疗效果显著优于维酶素组；蜥蜴散小剂量组与维酶素组比较P>0.05说明治疗效果无明显差别，考虑为剂量过小引起。蜥蜴散大、小剂量组之间比较（P<0 .05)，蜥蜴散中、小剂量组之间比较（P<0.05），说明蜥蜴散大、中剂量组疗效优于小剂量组。结果见表1。表1 不同治疗组血清TNFα的含量（略）
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