【摘要】目的建立一种测定桑枝中多糖含量的 方法 。方法采用水提醇沉法对桑枝中的多糖进行提取，用Sevag法等进行纯化，蒽酮-浓硫酸法测定多糖的含量。结果回归方程：A=0.024 94C+0.057 1，r=0.999 5，线性范围为0.08～0.4 μg·L-1。桑枝多糖的含量为18.74%（RSD=2.1%)，平均回收率为98.6%，RSD=1.4%。结论 该法简便、快速、重现性好，为桑枝的质量控制提供了方法。
【关键词】桑枝； 多糖； 蒽酮浓硫酸法
Abstract：ObjectiveTo establish a kind of determining method of contents of polysaccharides in Mulberry Twig. Methods The polysaccharide in Mulberry Twig was extracted with water and ethanol precipitation. Anthrone-sulfonic acid was applied to analysis of the contents of polysaccharides. ResultsThe content of polysaccharides in Mulberry Twig was 18.74 mg/g, average recovery was 98.6%, RSD=1.4%. ConclusionThe results showed that this method is simple, specific and accurate. It provides a method for mass control of Mulberry Twig.
Key words：Mulbery Twig； Polysaccharide； Anthrone-sulfonic acid method
桑枝为桑科植物桑Morus alba L.的嫩枝，Mulberry Twig桑枝：又名桑条，桑枝的药用 历史 悠久，《 中国 药典》记载为祛风湿，利关节的常用药，用于 治疗 肩臂关节酸痛麻木［1］。临床 应用 于关节肿痛、手足麻木、风湿痹痛、瘫痪等多种疾病。多糖是多种中草药的有效成分之一，多糖有十分广泛的生物活性，能促进人体的免疫功能，具有抗肿瘤、抗病毒、抗突变、抗辐射及降血压等功效［2，3］。对桑枝中多糖的 研究 具有重要的意义。有关桑枝多糖的化学研究，未见报道。为有效开发利用桑枝药材资源，揭示桑枝多糖与药效的关系，本文采用超声提取法提取桑枝中的多糖，蒽酮-浓硫酸法测定多糖的含量［4，5］。
1 仪器与试剂
TU1800SPC型紫外分光光度计；超声波清洗器；TOL40B离心机（上海安亭 科学 仪器厂）。无水葡萄糖、乙醇、蒽酮、浓硫酸、氯仿、正丁醇均为 分析 纯。蒽酮浓硫酸试剂（0.2 g∶100 ml）。桑枝，200405采于新疆喀什。
2 方法
2.1 桑枝多糖的提取称取干燥至恒重并过40目筛的桑枝粉末100 g，加水适量，于95℃时超声提取30 min，过滤，滤渣于95℃超声再提取30 min，相同条件下提取3次，合并提取液，于旋转蒸发仪上浓缩至100 ml，在其中加95%乙醇至含醇量为85%，4℃时静置过夜。于40 000 r/min的条件下离心分离，离心后的沉淀物加少量热水溶解，再加95%乙醇至含醇量为85%，静置过夜，离心分离，得粗多糖。
2.2 多糖的精制植物粗多糖中一般含有蛋白质，以游离态和结合态存在，将蛋白酶法和Sevag法结合起来，不但可脱去游离蛋白，而且可脱去结合蛋白质。将上述得到的粗多糖溶于水，加入2%木瓜蛋白酶，60℃时酶解2 h，再用Sevag法（氯仿∶正丁醇=4∶1）除蛋白15次。加1%活性碳脱色，抽滤，加入95%乙醇使含醇量达85%，4℃时静置过夜，离心分离。沉淀物冷冻干燥，即得精制淡黄色的桑枝多糖。
将多糖溶液进行200～400 nm紫外区扫描，无特征吸收峰，茚三酮反应为阴性，说明桑枝多糖中的蛋白质已除干净。
3 结果与讨论
3.1 标准溶液的制备精密称取葡萄糖对照品0.100 0 g，用蒸馏水溶解并定容至100 ml，配成浓度为1.000 mg/ml的标准储备液。
3.2 标准曲线的绘制精密吸取上述葡萄糖标准储备液0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5 ml于100 ml的容量瓶中，用蒸馏水定溶至刻度。分别取2.0 ml于25 ml具塞试管中，加蒽酮-浓硫酸试剂4 ml，放入沸水浴中加热8 min，迅速冷却至室温。于620 nm处测定吸光度值， 计算 回归方程：A=0.024 94C+0.057 1，r=0.999 5，线性范围为0.08～0.4 μg·L-1。
3.3 换算因子的测定精密称取精制后的桑枝多糖0.010 0 g，用少量热蒸馏水溶解后，定溶于100 ml容量瓶中，摇匀。精密吸取此溶液2 ml于25 ml具塞试管中，加蒽酮-浓硫酸试剂4 ml，沸水浴中加热8 min，迅速冷却至室温，于620 nm处测定吸收度。根据标准曲线计算浓度，再按下式计算换算因子，得f=9.618 9。
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